Прижизненное окрашивание
Прижизненное или витальное окрашивание — метод окрашивания организмов или живых препаратов их тканей для повышения контраста при наблюдении под микроскопом.
Иногда витальным окрашиванием называют также введение красителя в живой организм, с дальнейшим его умерщвлением и приготовлением микропрепарата[1].
Причины прижизненного окрашивания
Микроскопирование живых тканей имеет существенный недостаток — внутриклеточные структуры при таком исследовании сложно отличить друг от друга, поскольку они имеют сходные коэффициенты преломления света. Один из приёмов для преодоления этого недостатка состоит в окрашивании клеток и тканей (другой приём — использование специальных оптических устройств)[2].
Прижизненное окрашивание позволяет наблюдать одновременно как особенности строения, так и особенности функционирования организмов, клеток и тканей[2].
Ряд методов витального окрашивания микроорганизмов разработан и применяется в микробиологии.
Витальные красители
Красители, пригодные для прижизненного окрашивания, называются витальными. В отличие от многих других красителей, используемых в микроскопировании, они обладают двумя дополнительными свойствами: имеют низкую токсичность и обладают способностью легко проникать в живые клетки и их структуры через клеточные оболочки и цитоплазматические мембраны[2].
По оптическим свойствам различают витальные красители для видимого света и флуоресцентные красители (называемые также флуорохромами)[2].
По химическим свойствам различают основные, кислотные (кислые) и электронейтральные витальные красители[2].
- Основные красители
- Акридиновый оранжевый
- Метиленовый синий — используется для витального окрашивания простейших, изолированных клеток, культур тканей, тонких плёнок живых тканей. Используется раствор 1:1000 — 1:10 000. В ботанике используется для окраски вакуолей, накапливаясь в клетках, содержащих дубильные вещества. Может использоваться для окраски митохондрий[2].
- Кислотные (кислые) красители
- Индигокармин
- Кислый фуксин
- Калий-флуоресцин
- Эозин
- Нейтральные красители
- Родамин B
Примечания
Литература
- Барыкина Р. П. и др. Часть I.2. Прижизненное окрашивание // Справочник по ботанической микротехнике. Основы и методы. — М.: Изд-во МГУ, 2004. — С. 13—25. — 312 с. — 2000 экз. — ISBN 5-211-06103-9. — УДК 58:57.08
- Роскин Г. И. Микроскопическая техника. — М.: Советская наука, 1946. — 2000 экз.
- Прижизненное окрашивание / И. П. Суздальская // Большая советская энциклопедия : [в 30 т.] / гл. ред. А. М. Прохоров. — 3-е изд. — М. : Советская энциклопедия, 1969—1978.