Фенилметилсульфонил фторид

В биохимии фенилметан сульфонил фторид или фенилметилсульфонил фторид (англ. PMSF, сокращение от англ. phenylmethane sulfonyl fluoride или phenylmethylsulfonyl fluoride) — ингибитор сериновых протеаз, широко используемый при выделении белковых экстрактов из различных клеток. PMSF не ингибирует всех сериновых протеаз[источник?] . Он быстро разрушается в воде, поэтому в исходных ("стоковых") растворах в качестве растворителя, как правило, используется безводный этанол, изопропанол, кукурузное масло или ДМСО. Ингибирование протеолитических ферментов происходит при концентрации PMSF в диапазоне от 0,1 до 1 миллимоль. Период полужизни в водных растворах (при 25 °С) составляет 110 минут при pH 7, 55 минут при рН 7,5 и 35 минут при рН 8.[2]

Фенилметансульфонил флюорид ​(PMSF)​
Общие
Хим. формула C7H7FO2S
Термические свойства
Температура
 • плавления 93 °C[1]
Классификация
Рег. номер CAS 329-98-6
PubChem 4784
Рег. номер EINECS 206-350-2
SMILES
InChI
RTECS XT8040000
ChEBI 8102
ChemSpider 4620
Приведены данные для стандартных условий (25 °C, 100 кПа), если не указано иное.

PMSF специфично связывается сериновыми остатками актиного центра в сериновых протеазах, однако, не связывает каких-либо других остатков серина в ферменте. Это является следствием гиперактивности этого серинового остатка, вызванного специфическими условиями окружающей среды в активном центре фермента. Поскольку PMSF, ковалентно связывается с ферментом, комплекс может быть визуализирован с помощью рентгеновской кристаллографии; следовательно, PMSF может использоваться в качестве химической метки для идентификации серина в активном центре в фермента.

Фермент_(активный)-Ser-O-H + F-SO2СН2С6H5 → Фермент-Ser-O-SO2СН2С6H5 + HF
Сериновая протеаза + PMSF → необратимый комплекс Фермента-PMS  + HF

ЛД50 составляет менее 500 мг/кг[3]. PMSF является цитотоксическим химикатом, работа с которым должна проводиться только в вытяжном шкафу.

Примечания
  1. Bradley J., Williams A., Andrew S.I.D. Lang Jean-Claude Bradley Open Melting Point Dataset // Figshare — 2014. — doi:10.6084/M9.FIGSHARE.1031637.V2
  2. GT James. Inactivation of the protease inhibitor phenylmethylsulfonyl fluoride in buffers (англ.) // Analytical Biochemistry : journal. — 1978. — Vol. 86, no. 2. — P. 574—579. — doi:10.1016/0003-2697(78)90784-4. — PMID 26289.
  3. Roche Applied Science. The Complete Guide for Protease Inhibition. https://iti.stanford.edu/content/dam/sm/iti/documents/himc/immunoassays/ProteaseInhibitionGuide.pdf

См. также

Серпины — группа белков-ингибиторов сериновых протеаз.

Внешние ссылки
This article is issued from Wikipedia. The text is licensed under Creative Commons - Attribution - Sharealike. Additional terms may apply for the media files.