Иммунопроба

Метод иммунологического анализа (иммунохимический анализ) — это биохимический тест, который измеряет наличие или концентрацию макромолекул или микромолекул в растворе с помощью антитела или антигена.

Молекула, обнаруженная в результате теста, называется аналитом и во многих случаях является белком. Однако оно может быть разного типа и размера, пока антитело сохраняет способность распознавать и связывать определенную молекулу.

Аналиты в биологических жидкостях, таких как сыворотка или моча, часто измеряются с помощью этого метода в медицинских или исследовательских целях.

Метод иммунологического анализа применяется в различных формах: он может быть выполнен в случае гетерогенных (или сепаративных) тестов с несколькими этапами путем добавления и промывки реагентов или их разделения в разные этапы, или, в случае однородных (несепаративных) тестов, путем смешивания образца с реагентами и проведения физического измерения.

Принцип

Иммуноанализ основывается на способности антитела распознавать и связывать конкретную макромолекулу, которая может представлять собой сложную смесь макромолекул. В иммунологии конкретная макромолекула, связанная антителом, называется антигеном, а область на антигене, с которой связывается антитело, называется эпитопом.

В некоторых случаях в иммуноанализе можно использовать антиген для обнаружения в растворе антител, распознающих этот антиген. Другими словами, в некоторых иммуноанализах аналит может быть антителом, а не антигеном.

Помимо связывания антитела с его антигеном, другой ключевой особенностью всех иммуноанализов является способ получения измеримого сигнала в ответ на связывание. Большинство, хотя и не все, иммуноанализы включают химическое связывание антител или антигенов с какой-либо детектируемой меткой. В современных иммуноанализах существует большое количество меток, и они позволяют обнаруживать их различными способами. Многие метки поддаются обнаружению, потому что они либо излучают излучение, либо вызывают изменение цвета раствора, флуоресцируют на свету, либо могут излучать свет.

Примечания
  • Berson S. A., Yalow R. S., Bauman A., Rothschild M. A. and Newerly K., Insulin-I131 metabolism in human subjects: demonstration of insulin binding globulin in the circulation of insulin treated subjects, Journal of Clinical Investigation, vol. 35, no. 2, 170—190 (1956)
  • Yalow R. S. and Berson S. A., Immunoassay of endogenous plasma insulin in man, Journal of Clinical Investigation, vol. 39, no. 7,1157-1175 (1960)
  • Yalow R. S. and Berson S. A., Immunoassay of plasma insulin in man, Diabetes, vol. 10, no. 5, 339—344 (1961)
  • Wide L. and Porath J., Radioimmunoassay of proteins with the use of Sephadex-coupled antibodies, Biochimica et Biophysica Acta — General Subjects, vol. 130, no. 1, 257—260 (1966)
  • Nakane P. K. and Pierce G. B. Jr., Enzyme-labeled antibodies for the light and electron microscopic localization of tissue antigens, Journal of Cell Biology, vol. 33, no. 2, 307—318 (1967)
  • Avrameas S., Coupling of enzymes to proteins with glutaraldehyde. Use of the conjugates for the detection of antigens and antibodies, Immunochemistry, vol. 6, no. 1, 43-52 (1969)
  • Engvall E. and Perlmann P., Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Quantitative assay of immunoglobulin G, Immunochemistry, vol. 8, no. 9, 871—874 (1971)
  • van Weemen B. K. and Schuurs A. H. W. M., Immunoassay using antigen-enzyme conjugates, FEBS letters, vol. 15, no. 3, 232—236 (1971)
  • van Weemen B. K. and Schuurs A. H. W. M., Immunoassay using hapten-enzyme conjugates, FEBS letters, vol. 24, no. 1, 77-81 (1972)
  • Pittman J. A. Jr., RIA: An historical note, Clinical Chemistry, vol. 19, no. 7, 793 (1973)
  • van Weemen B. K. and Schuurs A. H. W. M,, Immunoassay using antibody-enzyme conjugates, FEBS letters, vol. 43, no. 2, 215—218 (1974)
  • Voller A., Bidwell D. E. and Engvall E., A microplate method of enzyme-linked immunosorbent assay and its application to malaria, Bulletin of the World Health Organization, vol. 51, no. 2, 209—211 (1974)
  • Voller A., Bidwell D. E. and Bartlett A., Enzyme immunoassays in diagnostic medicine, Bulletin of the World Health Organization, vol. 53, no. 1, 55-65 (1976)
  • Yalow R. S., Citation Classic, Current Contents, 14, 98 (1977)
  • Yalow R. S., Radioimmunoassay: a probe for the fine structure of biologic systems, Science, vol. 200, no. 4347, 1236—1245 (1978)
  • Engvall E., Citation Classic, Current Contents, 12, 16 (1987)
  • Voller A. and Bidwell D. E., Better health care with microplate ELISA, Citation Classic, Current Contents, 17, 14 (1989)
  • Mujumdar R. B., Ernst L. A., Mujumdar S. R. and Waggoner A. S., Cyanine dye labeling reagents containing isothiocyanate groups, Cytometry, vol. 10, no. 1, 11-19 (1989)
  • Yalow R. S., Remembrance project: origins of RIA, Endocrinology, vol. 129, no. 4, 1694—1695 (1991)
  • Engvall E., Perspective on the historical note on EIA/ELISA by Dr. R. M. Lequin, Clinical Chemistry, vol. 51, no. 12, 2225 (2005)
  • van Weemen B. K., The rise of EIA/ELISA, Clinical Chemistry, vol. 51, no. 12, 2226 (2005)
  • Lequin R. M., Enzyme Immunoassay (EIA)/Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA), Clinical Chemistry, vol. 51, no. 12, 2415—2418 (2005)
  • Avrameas S., Historical background of the invention of EIA and ELISA, Clinical Chemistry, vol. 52, no. 7, 1430—1431 (2006)
  • Hammarström S., Berzins K., Biberfeld P., Engvall E., Hammarström M.-L., Holm G., Troye-Blomberg M. and Wahlgren M., Peter Perlmann 1919—2005, Scandinavian Journal of Immunology, vol. 63, no. 6, 487—489 (2006)

Примечания
    This article is issued from Wikipedia. The text is licensed under Creative Commons - Attribution - Sharealike. Additional terms may apply for the media files.