Метод Лоури
Метод Лоури — один из колориметрических методов количественного определения белков в растворе. Предложен Лоури (Lowry) в 1951 году.[1] Является самой цитируемой научной статьей в мире (к январю 2004 года статья была процитирована более 275000 раз).[2]
Принцип
В щелочной среде ионы Cu2+ образуют комплекс с пептидными связями, переходя в Cu+. Одновалентные ионы меди реагируют с реактивом Фолина (фосфомолибденовая кислота с фенолом), образуя нестабильный продукт, переходящий в молибденовую синь, с максимумом поглощения при 750 нм. Увеличение поглощения при 750 нм пропорционально концентрации белка. Метод очень чувствителен к наличию в растворе посторонних восстановителей (что затрудняет его использование при определении белка в неочищенных препаратах), чувствительность к белку — 10-1000 мкг/мл.
Примечания
- The Journal of Biological Chemistry. — 1952. — V. 193. — P.265-275
- JBC — The Most Highly Cited Paper in Publishing History: Protein Determination by Oliver H. Lowry // The Journal of Biological Chemistry, 280, e25. July 15, 2005